Определение индикана

 

Определение основано на установлении интенсивности окрашивания, развивающейся при одной из реакций, свойственных индикану. Весьма удобна для практического применения модификация методики Розенберга, предложенная А. Я. Альтгаузеном.

Реактивы:

1) 20% раствор СС L 3 СООН;

2) 5% спиртовой раствор тимола;

3) реактив Обермейера, представляющий собой раствор 2 г хлорного железа в 1 л крепкой соляной кислоты с удельным весом 1,19;

4) хлороформ.

Производство определения: белки осаждают прибавлением к 3-4 мл сыворотки равного объема 20% СС L 3 СООН. Безбелковый фильтрат или центрифугат сливают в градуированную центрифужную пробирку и отмечают его количество. Прибавляют по 1 мл тимолового спирта и реактив Обермейера в количестве, равном всему объему жидкости в пробирке: смешивают и оставляют стоять в течение часа.

После этого добавляют 1 мл хлороформа и, предварительно закрыв пробкой, сильно встряхивают 1,5-2 минуты. После этого центрифугируют в течение 10 минут. Затем при помощи пастеровской пипетки отсасывают верхний слои жидкости, а хлороформ, окрашенный в фиолетовый цвет, разводят добавлением по каплям чистого хлороформа до слабого розовато-фиолетового окрашивания. При этом цвет окрашенного хлороформа сравнивается на белом фоне с окраской чистого хлороформа, налитого в такую же точно пробирку. По делениям на пробирке отмечают общее количество хлороформа, потребовавшегося на разведение образовавшегося индолигнона до слабо розоватого окрашивания.

Креатинин в (мг%) определяется по формуле = (0,0016 * количество хлороформа* 100) / (количество сыворотки крови*1,6)